Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/10889/11126
Title: Μελέτη επικύρωσης της συσχέτισης γενετικών δεικτών στο γονίδιο MAP3K5 με την ανταπόκριση ασθενών με β-μεσογειακή αναιμία στην υδροξυουρία και την βαρύτητα της νόσου
Authors: Σιαμόγλου, Σταυρούλα
Keywords: β-μεσογειακή αναιμία
Υδροξυουρία
Γενετικοί δείκτες
Βαρύτητα της νόσου
Keywords (translated): β-thalassemia
Hydroxyurea
MAP3K5
Abstract: Οι αιμοσφαιρινοπάθειες και κυρίως η δρεπανοκυτταρική αναιμία και η β-μεσογειακή αναιμία, αποτελούν τις πιο κοινές υπολειπόμενες αυτοσωμικές διαταραχές στο σύνολο του παγκόσμιου πληθυσμού. Η κλινική εικόνα των ασθενών χαρακτηρίζεται από μεγάλη ετερογένεια και τα συμπτώματα μπορεί να διαφέρουν σημαντικά ακόμη και μεταξύ ασθενών που φέρουν την ίδια μετάλλαξη στο HBB γονίδιο. Τα αυξημένα επίπεδα της εμβρυικής αιμοσφαιρίνης κατά την ενήλικη ζωή ενός ασθενή με β-μεσογειακή αναιμία, φαίνεται να συνεισφέρουν σημαντικά στην ηπιότερη κλινική εικόνα του ασθενή. Γενετικές παραλλαγές σε γονιδιακούς τόπους που βρίσκονται εντός (cis) αλλά και εκτός (trans) του συμπλέγματος του β-γονιδιακού τόπου, έχει δειχθεί πως συσχετίζονται σημαντικά με τα επίπεδα της εμβρυικής αιμοσφαιρίνης. Ένα από τα γονίδια αυτά είναι το γονίδιο MAP3K5 (ή ASK1), το οποίο κωδικοποιεί την πρωτεΐνη MAP3K5 που συμμετέχει στο σηματοδοτικό μονοπάτι των MAP κινασών. Λόγω της ευεργετικής δράσης της εμβρυικής αιμοσφαιρίνης στη συνολική κλινική εικόνα της ασθένειας, η φαρμακολογική επαγωγή της σύνθεσής της εμβρυικής αιμοσφαιρίνης αποτελεί επιδίωξη και απώτερο στόχο στο πεδίο των αιμοσφαιρινοπαθειών. Σήμερα, το μοναδικό εγκεκριμένο φάρμακο προς αυτήν την κατεύθυνση αποτελεί η υδροξυουρία. Η ανταπόκριση των ασθενών που πάσχουν από β-μεσογειακή αναιμία στην χορήγηση της υδροξυουρίας ποικίλει σημαντικά. Σκοπός της παρούσας εργασίας είναι να μελετηθεί η συσχέτιση των γονιδιακών παραλλαγών στο γονίδιο MAP3K5 (rs9376230, rs9483947 και ο αριθμός των επαναλήψεων της αλληλουχίας 5΄-GCGCG-3΄ στον υποκινητή του MAP3K5), με αυξημένα επίπεδα εμβρυικής αιμοσφαιρίνης σε πληθυσμό Ελλήνων ασθενών. Η συγκεκριμένη εργασία αποτελεί μελέτη επικύρωσης των αποτελεσμάτων και συμπερασμάτων της μελέτης «Genomic variation in the MAP3K5 gene is associated with b‑thalassemia disease severity and hydroxyurea treatment efficacy» της Ταφραλή και των συνεργατών της. Κατά την παρούσα εργασία αναλύθηκαν δείγματα DNA από τρεις διαφορετικές ομάδες Ελλήνων ασθενών. Συγκεκριμένα, αναλύθηκαν δείγματα ασθενών με μείζονα β-μεσογειακή αναιμία, ασθενών με β-μεσογειακή αναιμία μη εξαρτώμενη μεταγγίσεων και διπλά ετερόζυγων ασθενών για δρεπανοκυτταρική αναιμία και β- μεσογειακή αναιμία (υπό αγωγή με υδροξυουρία). Για την ταυτοποίηση των υπό μελέτη πολυμορφισμών εφαρμόστηκαν μεθοδολογίες PCR –RFLP, Ηeteroduplex Analysis και Sanger Sequencing. Τα αποτελέσματα μετά από γονοτύπηση των δειγμάτων ως προς τον rs9376230, υποδηλώνουν τη στατιστικά σημαντική συσχέτιση του rs9376230 με την ηπιότερη κλινική εικόνα της ασθένειας και την ανταπόκριση στη θεραπευτική αγωγή με HU. Αναφορικά με τον rs9483947 φαίνεται να υπάρχει μία στατιστικά σημαντική συσχέτιση του συγκεκριμένου SNP, με την ηπιότερη κλινική εικόνα της ασθένειας. Τέλος, όσον αφορά τη σύγκριση των «ανταποκρινόμενων» και «μη ανταποκρινόμενων» στην HU διπλά ετερόζυγων ασθενών για δρεπανοκυτταρική αναιμία και β-μεσογειακή αναιμία, υποδεικνύοντας τη στατιστικά σημαντική συσχέτιση του rs9483947 με την ανταπόκριση στη θεραπευτική αγωγή με HU. Τέλος τα αποτελέσματα γονοτύπησης ως προς το πλήθος των επαναλήψεων της αλληλουχίας 5΄-GCGCG-3΄ στον υποκινητή του MAP3K, υποδηλώνουν τη στατιστικά σημαντική συσχέτιση του αριθμού των τεσσάρων επαναλήψεων της αλληλουχίας 5΄-GCGCG-3΄ με την καλύτερη ανταπόκριση στη θεραπευτική αγωγή με HU.
Abstract (translated): Hemoglobinopathies represent the most common inherited autosomal disorders in the entire world population. The clinical phenotype is heterogeneous and the symptoms may vary significantly among patients with the same causative mutation in HBB gene. Elevated levels of fetal hemoglobin can contribute significantly to a milder clinical phenotype. Genetic variants of genes located either in the β-gene locus or not have been correlated with increased fetal hemoglobin levels. One of these genes is the MAP3K5, which encodes the MAP3K5 protein involved in the MAP kinase signaling pathway. The pharmacological induction of fetal hemoglobin has been shown to have a beneficial effect on the clinical phenotype of sickle cell anemia patients. Hydroxyurea is the only FDA approved drug for fetal hemoglobin induction to date. However, patients with β-thalassemia present a differential response to hydroxyurea administration. Herein, our aim was to examine the correlation of the variants rs9376230, rs9483947 and a 5-GCGCG-3 repeat located in MAP3K5 gene to hydroxyurea response and to disease severity. This work is a study to validate the results of the study "Genomic variation in the MAP3K5 gene is associated with b-thalassemia disease severity and hydroxyurea treatment efficacy" by Tafrali et al. Three separate groups of Greek patients were genotyped; patients with major β-thalassemia, patients with non-dependent β-thalassemia and double heterozygous patients for sickle cell anemia and β-thalassemia treated with hydroxyurea. Regarding the rs9376230, our results show that the absence of CC genotype is significantly correlated to a milder clinical phenotype and better response to hydroxyurea . Regarding the rs9483947, our results show that the absence of CC genotype is significantly correlated to a milder clinical phenotype and better response to hydroxyurea On the other hand, four repeats of 5-GCGCG-3 in the MAP3K5 promoter are significantly correlated with a better hydroxyurea response.
Appears in Collections:Τμήμα Φαρμακευτικής (ΜΔΕ)

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
Μεταπτυχιακή Διπλωματική εργασία.pdf4 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.