Διαμόλυνση ανθρώπινων λεμφοκυττάρων με τη χρήση λεντιιικού φορέα έκφρασης διαγονιδίου
Loading...
Date
2024-09-25
Authors
Αλεξανδρόπουλος, Γεώργιος
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Οι λευχαιμίες και τα λεμφώματα αντιπροσωπεύουν ένα σημαντικό ποσοστό των περιπτώσεων καρκίνου παγκοσμίως, με τις συμβατικές θεραπείες, όπως η χημειοθεραπεία και η ακτινοβολία, να οδηγούν συχνά σε σοβαρές παρενέργειες. Τα κύτταρα CAR-T (Τ-λεμφοκύτταρα με χιμαιρικό αντιγονικό υποδοχέα) έχουν αναδειχθεί ως μια πολλά υποσχόμενη θεραπευτική προσέγγιση, ιδίως για τη στόχευση κακοηθειών όπως τα λεμφώματα και οι λευχαιμίες των Β κυττάρων. Ωστόσο, οι θεραπείες με CAR-T κύτταρα συνδέονται με κινδύνους όπως το σύνδρομο απελευθέρωσης κυτταροκινών (CRS) και οι τοξικότητες εκτός στόχου. Η παρούσα μελέτη αποσκοπούσε στην επιτυχή διαμόλυνση ανθρώπινων λεμφοκυττάρων με τη χρήση λεντιιικού φορέα που θα περιέχει ένα νανοαντίσωμα (NbS) που στοχεύει την ειδική για τα λεμφοκύτταρα πρωτεϊνική κινάση τυροσίνης (LCK), παράλληλα με μια δομή CAR. Χρησιμοποιώντας λεντιιικούς φορείς, το NbS και ο CAR επιχειρήθηκε να εισαχθούν σε κύτταρα HEK293Ts, C20 και πρωτογενή Τ κύτταρα. Η έκφραση των NbS και CAR επιβεβαιώθηκε μέσω FACS και Western blotting. Πραγματοποιήθηκαν δοκιμασίες συν-ανοσοκατακρήμνισης (Co-IP) για τη διερεύνηση της αλληλεπίδρασης μεταξύ NbS και LCK, αν και δεν παρατηρήθηκε ισχυρή αλληλεπίδραση υπό τις συνθήκες που εξετάστηκαν. Επιπλέον, μια δοκιμή ελέγχου πολλαπλασιασμού με χρήση αναστολέων της LCK έδειξε ότι η αναστολή της LCK μείωσε τον πολλαπλασιασμό των Τ-κυττάρων, υπογραμμίζοντας τον κρίσιμο ρόλο της LCK στη δραστηριότητα των Τ-κυττάρων. Τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης υποδηλώνουν ότι η στόχευση της LCK με NbS έχει δυνατότητες ως μηχανισμός ασφαλείας στις θεραπείες CAR-T, προσφέροντας έναν τρόπο ελέγχου του πολλαπλασιασμού των Τ-κυττάρων. Απαιτείται περαιτέρω έρευνα για τη βελτιστοποίηση των αλληλεπιδράσεων NbS-LCK και την επικύρωση των θεραπευτικών δυνατοτήτων αυτής της προσέγγισης in vivo.
Description
Keywords
Λεμφοκύτταρα, Ιική διαμόλυνση, Κυτταρικές θεραπείες