Επαναπρογραμματισμός αστρογλοιακών κυττάρων του εγκεφάλου μυών προς τη δημιουργία νευρώνων και γλοίων κυττάρων
| datacite.contributor.RelatedPerson | Μαργαρίτη, Μαριγούλα | |
| datacite.contributor.RelatedPerson | Θωμαΐδου, Δήμητρα | |
| datacite.contributor.Supervisor | Καζάνης, Ηλίας | |
| dc.contributor.author | Κακογιάννης, Δημήτριος | |
| dc.contributor.other | Kakogiannis, Dimitrios | |
| dc.date.accessioned | 2023-10-12T11:38:52Z | |
| dc.date.available | 2023-10-12T11:38:52Z | |
| dc.date.issued | 2023-10-10 | |
| dc.degree | masterThesis | |
| dc.description.abstract | Ο επαναπρογραμματισμός αποτελεί μία νέα προσέγγιση στην αποκατάσταση οργάνων με περιορισμένη αυτοανανεωτική ικανότητα, όπως ο εγκέφαλος. Στην τεχνολογία αυτή χρησιμοποιούνται ιικοί φορείς. Μια ασφαλής και οικονομική εναλλακτική είναι ο χημικός επαναπρογραμματισμός, αντικαθιστώντας τους ιικούς φορείς με χημικά μόρια. Στην παρούσα εργασία, προκαλέσαμε τη διαφοροποίηση των Νευρικών Βλαστικών Κυττάρων (ΝΒΚ) απομονωμένων από την υποεπενδυματική ζώνη των πλάγιων κοιλιών σε αστροκύτταρα χρησιμοποιώντας ένα προσδιορισμένο πρωτόκολλο καλλιέργειας τους σε 10% Fetal Bovine Serum (FBS). Αφού επιβεβαιώσαμε την παρουσία αστροκυττάρων, επιχειρήσαμε τον επαναπρογραμματισμό τους σε τύπου προγονικά κύτταρα καταστέλλοντας τα σηματοδοτικά μονοπάτια GSK3 και TGF-β σε ένα περιβάλλον προωθεί την αυτοανανέωση των ΝΒΚ. Για να χαρακτηρίσουμε αυτά τα κύτταρα, πραγματοποιήσαμε ανοσοκυτταροχημικές χρώσεις έναντι δεικτών βλαστικών και προγονικών κυττάρων και συγκρίναμε τον μοριακό τους προφίλ με αυτό των νευροσφαιρών χρησιμοποιώντας RT-qPCR. Συνολικά, τα επαναπρογραμματισμένα κύτταρα εκφράζουν τους δείκτες βλαστοκυττάρων Nestin και Sox2 και εμφανίζουν χαμηλότερη έκφραση των δεικτών διαφοροποίησης (Mash1 και Dlx2) και υψηλότερη έκφραση των δεικτών βλαστικότητας (Glast, EGFR και CD9) σε σύγκριση με τις νευρόσφαιρες. Τέλος, εξετάσαμε την δυναμικό διαφοροποίησής τους, το οποίο παραμένει γλοιογενετικό με προτίμηση προς την ολιγοδενδρογένεση. Τα αποτελέσματά μας υποδεικνύουν ότι η καταστολή των σηματοδοτικών οδών GSK3 και TGF-β επαναφέρει τα αστροκύτταρα σε μια προγονική κατάσταση που ομοιάζει με τα ενεργοποιημένα ΝΒΚ. | |
| dc.description.translatedabstract | Lineage reprogramming is a concept aiming at rejuvenating organs with limited self healing, like the brain. It transforms cells using pioneer transcription factors. Traditional methods, using viral vectors, are costly and raise safety concerns. A safer, cost effective approach is chemical reprogramming, using small molecules to alter cell identity. We explored this by dedifferentiating astrocytes in vitro using a specialized culture medium. Here, we induce the differentiation of Subependymal Zone derived Neural Stem Cells (NSC) into astrocytes using an established protocol of culturing them in 10% Fetal Bovine Serum (FBS). After validating the presence of astrocytes, we aim at reprogramming them into progenitor-like cells by downregulating the GSK3 and TGF-β pathways in a differentiating-restrictive environment. To characterize these cells, we performed immunocytochemical stainings against neural stem/progenitor cell markers and compared their molecular profile against that of neurospheres using RT-qPCR. Overall, the reprogrammed cells express the stem cell markers Nestin and Sox2 and show lower expression of early NSC differentiation markers (Mash1 and Dlx2) and higher expression of stemness markers (Glast, EGFR, and CD9) compared to neurospheres. Finally, we explored their differentiation potential which remains gliogenic with a bias towards oligodendrogenesis. Our results indicate that the downregulation of the GSK3 and TGF-β pathways revert astrocytes to a progenitor state resembling activated NSCs. | |
| dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/10889/25886 | |
| dc.language.iso | el | |
| dc.rights | Attribution-NoDerivs 3.0 United States | * |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nd/3.0/us/ | * |
| dc.subject | Αστροκύτταρα | |
| dc.subject | Επαναπρογραμματισμός | |
| dc.subject | Αποδιαφοροποίηση | |
| dc.subject.alternative | Astrocytes | |
| dc.subject.alternative | Reprogramming | |
| dc.subject.alternative | Dedifferentiation | |
| dc.title | Επαναπρογραμματισμός αστρογλοιακών κυττάρων του εγκεφάλου μυών προς τη δημιουργία νευρώνων και γλοίων κυττάρων | |
| dc.title.alternative | Reprogramming of mouse astrocytes towards neurons and glial cells |
Files
Original bundle
1 - 1 of 1
Loading...
- Name:
- ΜΔE_Επαναπρογραμματισμός αστρογλοιακών κυττάρων του εγκεφάλου μυών προς τη δημιουργία νευρώνων και γλοίων κυττάρων.pdf
- Size:
- 2.98 MB
- Format:
- Adobe Portable Document Format
License bundle
1 - 1 of 1
No Thumbnail Available
- Name:
- license.txt
- Size:
- 5.02 KB
- Format:
- Item-specific license agreed upon to submission
- Description: