Εφαρμογή μικροσκοπίας διαστολής σε ευκαρυωτικά κύτταρα
Loading...
Date
2026-07-09
Authors
Καζάκος, Βασίλειος
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Η περιορισμένη διακριτική ικανότητα των συμβατικών μικροσκοπίων φθορισμού εξαιτίας του φαινομένου της περίθλασης του φωτός, σε συνδυασμό με την αυξημένη πολυπλοκότητα και κόστος των προηγμένων οργάνων μικροσκοπίας οδήγησε στην ανάπτυξη της μικροσκοπίας διαστολής, μιας τεχνικής που αποσκοπεί στη βελτίωση της διακριτικής ικανότητας μέσω της απεικόνισης μεγεθυμένων βιολογικών δειγμάτων, χρησιμοποιώντας χημικές διεργασίες. Στην παρούσα διπλωματική εργασία έγινε προσπάθεια εφαρμογής του πρωτοκόλλου μικροσκοπίας διαστολής, που βασίζεται στη μελέτη των πρωτεϊνών ενός δείγματος, σε τρεις κυτταρικές σειρές. Η διαδικασία περιελάμβανε κατά κανόνα διαδοχικά τη μονιμοποίηση των κυττάρων, τη χρώση τους, την ενσωμάτωσή τους σε υδρογέλη με ικανότητα διόγκωσης παρουσία νερού, ακολουθούμενη από την μηχανική ομογενοποίηση του δείγματος, τη διαστολή του σε υδατικό περιβάλλον και τέλος την παρατήρησή του σε μικροσκόπιο φθορισμού. Σε όλες τις πειραματικές προσεγγίσεις που παρουσιάζονται στη συγκεκριμένη εργασία (οι οποίες αφορούν δείγματα κυττάρων) ακολουθήθηκε το πρωτόκολλο της μικροσκοπίας διαστολής που περιεγράφηκε προηγουμένως, επιδεικνύοντας, στην πλειοψηφία των περιπτώσεων, ικανοποιητική έκταση της διαστολής των δειγμάτων πρωτίστως και επαρκή διατήρηση του σήματος των φθοριζουσών ουσιών και των φθοροφόρων μορίων που χρησιμοποιήθηκαν δευτερευόντως.
Description
Keywords
Μικροσκοπία διαστολής, Διαδικασία ανοσοφθορισμού, Μικροσοπία φθορισμού, Υδρογέλη, β-τουμπουλίνη, VE-καντχερίνη