Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 1-61 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin)
Loading...
Date
2023-07-20
Authors
Κόρκα, Δήμητρα
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Τα νανοσώματα χρησιμοποιούνται για τη θεραπεία διάφορων ασθενειών, καθώς αποτελούν το μικρότερο θραύσμα της δραστικής περιοχής των αντισωμάτων. Το Bevacizumab με εμπορικό σήμα Avastin είναι ένα μονοκλωνικό αντίσωμα που εμποδίζει την αγγειογένεση αναστέλλοντας τον αγγειακό ενδοθηλιακό αυξητικό παράγοντα Α (VEGF-A). O VEGF-A είναι μια πρωτεΐνη αυξητικού παράγοντα που διεγείρει την αγγειογένεση σε μια ποικιλία ασθενειών, ειδικά στον καρκίνο.
Στη παρούσα μεταπτυχιακή διπλωματική εργασία μελετήθηκε η σύνθεση του υδραζιδίου του τμήματος Glu(1)-Ala(61) του νανοσώματος του Avastin, με σκοπό τη χρησιμοποίησή του στην ολική χημική σύνθεση του νανοσώματος, μέσω της μεθόδου της φυσικής χημικής σύνδεσης (Native Chemical ligation, NCL). H πεπτιδική αλυσίδα συντέθηκε με συνδυασμό μεθόδων πεπτιδικής σύνθεσης, όπως είναι η σύνθεση σε στερεή φάση, η σύνθεση κατά στάδια και η συμπύκνωση πεπτιδικών τμημάτων σε στερεή φάση.
Η πεπτιδική σύνθεση έγινε επί της 2-χλωροτρίτυλο χλωρίδιο ρητίνης (CLTRCl) και επί της υδραζίνης-2-χλωροτρίτυλο ρητίνης μέσω της μεθόδου Fmoc/tBu. Ο έλεγχος της πορείας της σύνθεσης και της καθαρότητας των ενδιαμέσων και του τελικού πεπτιδίου έγινε μέσω της μεθόδου της Υγρής Χρωματογραφίας Υψηλής Επίδοσης Ανάστροφης Φάσης (RP-HPLC), ενώ η ταυτοποίηση των προϊόντων έγινε μέσω της τεχνικής της φασματομετρίας μάζας ιονισμού από ηλεκτρικό πεδίο με ψεκασμό (ESI-MS).
Description
Keywords
Νανοσώματα, Πεπτιδική σύνθεση, Στερεή φάση, Τμηματική συμπύκνωση, 2-χλωροτρίτυλο χλωρίδιο ρητίνη (CLTR-Cl), Υδραζίνη-2-χλωροτρίτυλο ρητίνη