Σύνθεση και βιολογική αξιολόγηση δυνητικά αντιβακτηριακών πεπτιδίων
Loading...
Date
Authors
Πλακαντωνάκη, Μαρία
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Τα βακτήρια μπορούν και επιβιώνουν κάτω από αντίξοες περιβαλλοντικές συνθήκες με διάφορους κυτταρικούς μηχανισμούς. Ένας από αυτούς είναι τα ενδογενή συστήματα τοξινών-αντιτοξινών που επιτρέπουν την επιβίωση των βακτηρίων σε εχθρικά περιβάλλοντα. Στην παρούσα διπλωματική εργασία, πραγματοποιήθηκε η σύνθεση και η in vitro αξιολόγηση των πεπτιδικών αναλόγων των τοξινών-αντιτοξινών MqsΑ, MqsR, HicA και RelE της Escherichia coli. Η σύνθεση των αναλόγων έγινε σε στερεά φάση επί της 2-χλωροτριτυλοχλωριδίου ρητίνης (CLTR-Cl), η οποία συνδυάζεται με την Fmoc/tBu μεθοδολογία, χρησιμοποιώντας τα Ν,Ν'-διισοπρoπυλοκαρβοδιιμίδιο/1-υδροξυβενζοτριαζόλιο (DIC/HOBt) ως αντιδραστήρια σύζευξης. Η Να ομάδα των αμινοξέων προστατεύτηκε με Fmoc, ενώ η πλευρική αλυσίδα του κάθε αμινοξέος προστατεύτηκε ως εξής: Arg(Pbf), Asn(Trt), Cys(Trt), Asn(Trt), Glu(tBu), His(Trt), Lys(Boc), Ser(tBu), Thr(tBu), Tyr(tBu).
Ο έλεγχος της καθαρότητας των τελικών προϊόντων έγινε με υγρή χρωματογραφία υψηλής επίδοσης ανάστροφης φάσης (RP-HPLC) και η ταυτοποίησή τους με φασματομετρία μάζας (ESI-MS).
Την σύνθεση ακολούθησε in vitro αξιολόγηση των πεπτιδίων. Μελετήθηκε η δευτεροταγής δομής των τεσσάρων πεπτιδικών αναλόγων με φασματομετρία κυκλικού διχρωισμού και εξετάστηκε και η αλληλεπίδραση τους με λιπιδικές μεμβράνες λιποσωμάτων.
Description
Keywords
Λιποσώματα, Σύνθεση πεπτιδίων σε στερεά φάση, Κυκλικός διχρωισμός, Λιπιδικές μεμβράνες, Συστήματα τοξίνης-αντιτοξίνης