Μελέτη της μεταβολής της έκφρασης του ρυθμιστικού μορίου miR-21 σε CD4 κύτταρα υγιών ατόμων και ασθενών με ψωρίαση
Loading...
Date
2024-07-02
Authors
Πανουτσοπούλου, Μαρίζα
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Η ψωρίαση είναι μια χρόνια φλεγμονώδης νόσος, η οποία οφείλεται κυρίως στη δραστηριοποίηση των CD4 Τ λεμφοκυττάρων τα οποία έχουν θεμελιώδη ρόλο στην καταστολή των ανοσολογικών αποκρίσεων. Σε αυτήν την εργασία, στοχεύουμε να μελετήσουμε το προφίλ έκφρασης του miR-21 σε CD4 κύτταρα σε ασθενείς με ψωρίαση.
Για την υλοποίηση της μελέτης, χρησιμοποιήσαμε δείγμα περιφερικού αίματος από συνολικά 5 ασθενείς και 3 υγιείς. Στο δείγμα αίματος, πραγματοποιήθηκε διαχωρισμός των λεμφοκυττάρων μέσω διαβάθμισης φικόλης και ακολούθως, διαχωρίστηκαν τα CD4 με τη χρήση σφαιριδίων μαγνητικού διαχωρισμού (BD IMag Cell Separation). Με τη βοήθεια κυτταρομετρητή ροής μέσω φθορισμού (FACS Melody Cell Sorter) και με τη χρήση του αντισώματος CD4 ελέγχθηκε η καθαρότητα και η βιωσιμότητα του απομονωμένου CD4 πληθυσμού. Στη συνέχεια, απομονώθηκε το ολικό RNA από τα CD4 κύτταρα και κατασκευάστηκε cDNA με ειδική ενίσχυση στο 3’ άκρο για τη μετέπειτα ποσοτικοποίηση της έκφρασης του miR-21 μέσω ποσοτικής αντίδρασης πολυμεράσης (qPCR). Τα αποτελέσματα της qPCR υποβλήθηκαν σε στατιστική ανάλυση με τη χρήση του Mann-Whitney U test, για την περαιτέρω ερμηνεία τους. Τα παρόντα αποτελέσματα, που αφορούν το miR-21, με P = 0,78, υποδηλώνουν πως δεν υπάρχει κάποια στατιστικά σημαντική διαφορά στην έκφρασή του, μεταξύ ασθενών και υγιών ατόμων.
Μελετώντας τη μεταβολή των επιπέδων έκφρασης του miR-21 σε CD4 κύτταρα σε ασθενείς με ψωρίαση και υγιή άτομα, σκοπεύουμε να διαλευκάνουμε περαιτέρω την επίδραση του γονιδίου στο μοριακό μηχανισμό παθοφυσιολογίας της ψωρίασης.
Description
Keywords
Ψωρίαση, CD4 κύτταρα, Μικρά μη κωδικά μόρια RNA