Σχεδιασμός και σύνθεση πεπτιδικών αναλόγων, επιτόπων των πρωτεϊνών της μυελίνης
| dc.contributor.advisor | Τσέλιος, Θεόδωρος | |
| dc.contributor.author | Ντελή, Αγαθή | |
| dc.contributor.committee | Τσέλιος, Θεόδωρος | |
| dc.contributor.committee | Γάτος, Δημήτριος | |
| dc.contributor.committee | Βλάμης, Αλέξιος | |
| dc.contributor.other | Nteli, Agathi | |
| dc.date.accessioned | 2016-12-15T17:28:36Z | |
| dc.date.available | 2016-12-15T17:28:36Z | |
| dc.date.copyright | 2015-10-16 | |
| dc.degree | Μεταπτυχιακή Εργασία | el |
| dc.description.abstract | Η Σκλήρυνση Κατά Πλάκας (ΣΚΠ) είναι μία χρόνια φλεγμονώδης αυτοάνοση νόσος του Κεντρικού Νευρικού Συστήματος (ΚΝΣ) που προκαλεί την καταστροφή της μυελίνης γύρω από τους νευράξονες και την δυσλειτουργία στη μετάδοση των νευρικών ερεθισμάτων. Η έναρξη της ανοσολογικής απόκρισης στη ΣΚΠ γίνεται με τη δημιουργία του τριμοριακού συμπλόκου ανάμεσα στο Μείζον Σύστημα Ιστοσυμβατότητας (Major Histocombatibility Complex, MHC ή Human Leukocyte Antigen, HLA), το αντιγόνο και τον υποδοχέα του Τ-κυττάρου (T-cell Receptor, TCR). Ο σχεδιασμός και η σύνθεση πεπτιδικών αναλόγων αλλά και τροποποιημένων πεπτιδικών αναλόγων (APLs) των πρωτεϊνών της μυελίνης που θα έχουν ισχυρή πρόσδεση με το MHC/HLA αλλά όχι με τον TCR θα μπορούσε να αναστείλει την ενεργοποίηση των εγκεφαλιτογόνων Τ-κυττάρων. Έχει βρεθεί ότι ανοσοκυρίαρχοι επίτοποι που συμμετέχουν στην ενεργοποίηση των Τ-κυττάρων στη ΣΚΠ και έχουν μελετηθεί σε κλινικές δοκιμές είναι οι MBP13-32, MBP83-99, MBP111-129, MBP146-170, MOG1-20, MOG35-55 και PLP139-154. Στα πλαίσια της παρούσας διπλωματικής εργασίας συντέθηκαν ανάλογα των επιτόπων MBP83-99, MBP13-32, PLP139-151, PLP139-154 και OVA323-339 (επίτοπος της οβαλβουμίνης ο οποίος δεσμεύεται στο MHC/HLA τάξης ΙΙ). Η σύνθεση των πεπτιδίων έγινε σε στερεή φάση κατά στάδια επί της 2-χλωροτριτυλοχλωριδίου ρητίνης (CLTR-Cl) ακολουθουμένη από την Fmoc/tBu μεθοδολογία και χρησιμοποιώντας τα Ν,Ν΄-διισοπροπυλοκαρβοδιιμίδιο και 1-υδροξυβενζοτριαζόλιο (DIC/HOBt) ως αντιδραστήρια σύζευξης. Ο καθαρισμός των τελικών προϊόντων έγινε με Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Επίδοσης Ανάστροφης Φάσης (RP-HPLC) και η ταυτοποίησή τους με Φασματομετρία Μάζας (ESI-MS). Επίσης, πραγματοποιήθηκε ο καθαρισμός με ημιπαρασκευαστικό RP-HPLC πεπτιδικών αναλόγων της μυελίνης με σκοπό την in vivo και in vitro βιολογική τους αποτίμηση σε συνδυασμό με τον αυξητικό παράγοντα FGF2v, έναν παράγοντα που συμμετέχει στην μυελίνωση και την ανάπτυξη του νευρικού συστήματος. | el |
| dc.description.translatedabstract | Multiple Sclerosis (MS) is a chronic inflammatory autoimmune disease of the Central Nervous System (CNS) that leads to the destruction of the myelin that surrounds the neuroaxons and the dysfunction of the nervous signals transmitting. Immune response in MS is induced by the formation of the trimolecular complex between the Major Histocombatibility Complex (MHC) or Human Leukocyte Antigen (HLA), the antigen and the T-cell receptor (TCR). Design and synthesis of peptide analogues and altered peptide ligands (APLs) of the immunodominant epitopes of myelin, with high affinity to the MHC and not to the TCR, could inhibit the induction of encephalitogenic T-cells. The epitopes MBP13-32, MBP83-99, MBP111-129, MBP146-170, MOG1-20, MOG35-55 and PLP139-154 which have been studied in clinical trials, are considered as the main immunodominant epitopes that stimulate the T-cells. In this study, peptide analogues of MBP83-99, MBP13-32, PLP139-151, PLP139-154 and OVA323-339 (ovalbumin epitope which binds to the MHC/HLA II class) epitopes were synthesized. The synthesis of the peptide analogues was achieved using the 2-chlorotritylchloride resin (CLTR-Cl) combined with Fmoc/tBu methodology, utilizing Ν,Ν΄-diisopropylcarbodiimide and 1–hydroxybenzotriazole (DIC/HOBt) as coupling reagents. The purification of the final products was accomplished with Reversed Phase High-Perfomance Liquid Chromatography (RP-HPLC) and their identification was achieved with Electrospray Ionization Mass Spectroscopy (ESI-MS). Moreover, other peptides of myelin sheath were purified with semi-preparative RP-HPLC in order to evaluate in vivo and in vitro their activity in combination with the FGF2v (Fibroblast Growth Factor), which has been implicated in diverse biological processes, such as myelination and nervous system development. | el |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10889/9823 | |
| dc.language.iso | gr | el |
| dc.rights | 12 | el |
| dc.subject | Σκλήρυνση κατά πλάκας (ΣΚΠ) | el |
| dc.subject | Βασική πρωτεΐνη της μυελίνης (MBP) | el |
| dc.subject | Πρωτεολιπιδική πρωτεΐνη της μυελίνης (PLP) | el |
| dc.subject | Τροποποιημένα πεπτιδικά ανάλογα (APLs) | el |
| dc.subject | Πεπτιδική σύνθεση σε στερεή φάση | el |
| dc.subject | Κυκλικά πεπτίδια | el |
| dc.subject.alternative | Multiple sclerosis (MS) | el |
| dc.subject.alternative | Myelin basic protein (MBP) | el |
| dc.subject.alternative | Proteolipid protein of myelin (PLP) | el |
| dc.subject.alternative | Altered peptide ligands (APLs) | el |
| dc.subject.alternative | Solid phase peptide synthesis (SPPS) | el |
| dc.subject.alternative | Cyclic peptides | el |
| dc.title | Σχεδιασμός και σύνθεση πεπτιδικών αναλόγων, επιτόπων των πρωτεϊνών της μυελίνης | el |
| dc.title.alternative | Design and synthesis of peptide analogues of myelin proteins | el |
| dc.type | Thesis | el |