Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη
Loading...
Date
Authors
Γκίκα, Αρετή
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Στα πλαίσια της παρούσας διπλωματικής εργασίας μελετήθηκε σύζευγμα του πεπτιδικού αναλόγου [KG]5-MOG35-55 με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη στην οξειδωμένη μορφή της. Το εν λόγω σύζευγμα έχει μελετηθεί εκτενώς στο εργαστήριο και έχει βρεθεί να αναστέλλει την εμφάνιση των συμπτωμάτων της Σκλήρυνσης Κατά Πλάκας στο χρόνιο ζωικό μοντέλο της Πειραματικής Αυτοάνοσης Εγκεφαλομυελίτιδας (ΕΑΕ, Experimental Autoimmune Encephalomyelitis).
Διερευνήθηκε η σύζευξη του πεπτιδίου με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη σε υδατικό διάλυμα και τα αποτελέσματα έδειξαν ότι μπορεί να επιτευχθεί δίνοντας την δυνατότητα εύρεσης καλύτερης φαρμακοτεχνικής μορφής στο σύζευγμα.
Στην συνέχεια πραγματοποιήθηκαν πειράματα με στόχο την αποκόλληση του πεπτιδικού αναλόγου από τον πολυσακχαρίτη μαννάνη. Έγινε προσπάθεια αποκόλλησης ολόκληρης της πεπτιδικής αλληλουχίας καθώς και στοχευμένων τμημάτων αυτής. Για τον σκοπό αυτό χρησιμοποιήθηκαν χημικοί μέθοδοι σε διαλύματα διαφορετικής οξύτητας καθώς και πρωτεολυτική διάσπαση του πεπτιδίου με χρήση του ενζύμου θρυψίνη.
Τέλος αναπτύχθηκε μέθοδος με ηλεκτροφόρηση (tricine SDS-PAGE) για τον ποσοτικό προσδιορισμό του ελεύθερου πεπτιδικού αναλόγου που δύναται να μείνει ασύζευκτο μετά από ατελή αντίδραση σύζευξης με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη.
Description
Keywords
Σκλήρυνση κατά πλάκας, Θρυψίνη, Ηλεκτροφόρηση SDS-PAGE, Απομυελίνωση