Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης τμημάτων του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin)
Loading...
Date
2023-07-20
Authors
Θεοδωροπούλου, Βασιλική
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Ο καρκίνος αποτελεί την κυριότερη αιτία θανάτου σε ηλικίες κάτω των 85 ετών ήδη από το 1999 και οι ασθενείς έχουν ανάγκη από νέες θεραπευτικές επιλογές. Στόχος των νέων θεραπευτικών σχημάτων είναι η εκμετάλλευση των εγγενών διαφορών μεταξύ φυσιολογικών και καρκινικών κυττάρων. Η υψηλή συγγένεια σύνδεσης, των μονοκλωνικών αντισωμάτων με τους στόχους, τα καθιστά πολύ ασφαλή και χρήσιμα βιολογικά φάρμακα για τη θεραπεία του καρκίνου. Το μονοκλωνικό αντίσωμα μπεβασιζουμάμπη (Avastin®) αποτέλεσε την πρώτη εγκεκριμένη θεραπεία από τον FDA για την αναστολή της αγγειογένεσης.
Λόγω του μεγάλου μεγέθους των μονοκλωνικών αντισωμάτων, κρίθηκε απαραίτητη η βελτίωση της διείσδυσης τους στους ιστούς και η μείωση της ανοσογονικότητάς τους. Έτσι, η επιστήμη οδηγήθηκε τελικά στα νανοσώματα - το μικρότερο λειτουργικό θραύσμα δέσμευσης αντιγόνου. Το σημαντικότερο μειονέκτημα των νανοσωμάτων αφορά την δυσκολία παραγωγής και απομόνωσης τους, καθώς λαμβάνονται κυρίως από διάφορα είδη καμηλιδών, περιορίζοντας έτσι την χρήση τους.
Στόχος αυτής της εργασίας είναι η μελέτη της χημικής σύνθεσης και του καθαρισμού ενός τμήματος του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης. Η πεπτιδική σύνθεση έγινε σε στερεή φάση (SPPS), step by step, με την μεθοδολογία Fmoc/tBu. Οι ρητίνες που χρησιμοποιήθηκαν είναι η 2-χλωροτρίτυλο χλωρίδιο ρητίνη (CLTR-CL) και η Fmoc-υδραζίνη-2-χλωροτρίτυλο ρητίνη. Οι αναλυτικές τεχνικές που χρησιμοποιήθηκαν για τον έλεγχο της πορείας της σύνθεσης είναι η υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης ανάστροφης φάσης (RP-HPLC) και η φασματομετρία μαζών ιοντισμού με ηλεκτροψεκασμό (ESI-MS). Ο καθαρισμός των συντιθέμενων πεπτιδίων έγινε με ημιπαρασκευαστικό RP-HPLC και η ξήρανση του τελικού προϊόντος με λυοφιλοποίηση.
Description
Keywords
Πεπτιδική σύνθεση, Στερεή φάση, Υδραζίνη-2-χλωροτρίτυλο ρητίνη, Νανοσώματα, Μπεβασιζουμάμπη