Ο ρόλος των μεταγραφικών παραγόντων Coup-TF στη διαφοροποίηση των νευροβλαστικών κυττάρων
Loading...
Date
Authors
Μέρη, Κασσάνδρα - Δανάη
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Οι μεταγραφικοί παράγοντες της οικογένειας των COUP TFs (Chicken Ovalbumin Upstream Promoter Transcription Factors), εμπλέκονται σε πλήθος γεγονότων της εμβρυικής ανάπτυξης και οργανογένεσης. Στην παρούσα μελέτη διερευνάται ο ρόλος του μεταγραφικού παράγοντα Coup-TFII στη βιολογία των νευροβλαστικών κυτάρρων (NBK). NBK απομονώνονται από τον εγκέφαλο πειραματόζωων, συγκεκριμένα από την περιοχή της υποεπενδυματικής ζώνης και καλλιεργούνται υπο την μορφή νευρόσφαιρων. Τα NBK είναι πολυδύναμα και μπορούν να διαφοροποιηθούν προς νευρικά ή γλοιακά κύτταρα. Οι νευρόσφαιρες καλλιεργούνται σε θρεπτικό μέσο με προσθήκη Epidermal Growth Factor (EGF) και Fibroblast Growth Factor (FGF) οι οποίοι προωθούν τον πολλαπλασιασμό των νευρικών προγονικών και βλαστικών κυττάρων. Κύτταρα που αναπτύσσονται σε θρεπτικό μέσο δίχως τους παραπάνω αυξητικούς παράγοντες διαφοροποιούνται στους διάφορους κυτταρικούς τύπους του Νευρικού Συστήματος (νευρικά, αστρογλοικά ολιγοδενδογλοιακά κύτταρα). Παράλληλα μελετάται η γλοιογένεση και η νευρογένεση σε κυτταρικό πληθυσμό που αναπτύσσεται σε συνθήκες διαφοροποίησης αλλά με σταδιακή αφαίρεση των αυξητικών παραγόντων .
Με της χρήση της μεθόδου του ανοσοφθορισμού, σε συνθήκες πολλαπλασιασμού αλλά και διαφοροποίησης ταυτοποιήθηκαν οι προαναφερόμενοι κυτταρικοί τύποι και διαπιστώθηκε η ύπαρξη του COUPTF II και το προφίλ έκφρασης των κυτταρικών δεικτών που χρησιμοποιήθηκαν για το σκοπό αυτό . Επιπλέον, με τη μέθοδο της qPCR επιβεβαιώθηκε και ποσοτικοποιήθηκε η έκφραση των παραγόντων COUPTF I και COUP TF II στις διάφορες συνθήκες.
Ακόλουθα, με τη χρήση ιικών φορέων, προκλήθηκε υπερέκφραση του Coup-TF ΙΙ σε νευρόσφαιρες, στο στάδιο που διατηρούν ακόμα το βλαστικό τους χαρακτήρα. Τα κύτταρα αυτά καλλιεργούνται σε συνθήκες πολλαπλασιασμού και διαφοροποίησης αντίστοιχα προκειμένου να μελετηθεί η επίδραση της τροποποίησης της έκφρασης του Coup-TFΙΙ στην αναπτυξιακή τους τύχη.
Description
Keywords
Νευροβλαστικά κύτταρα