Ο ρόλος των μεταγραφικών παραγόντων Coup-TF στη διαφοροποίηση των νευροβλαστικών κυττάρων
| dc.contributor.advisor | Φλυτζάνης, Κωνσταντίνος | |
| dc.contributor.author | Μέρη, Κασσάνδρα - Δανάη | |
| dc.contributor.committee | Καζάνης, Ηλίας | |
| dc.contributor.committee | Κατσώρης, Παναγιώτης | |
| dc.contributor.committee | Φλυτζάνης, Κωνσταντίνος | |
| dc.contributor.other | Meri, Kassandra - Danai | |
| dc.date.accessioned | 2017-06-28T08:26:10Z | |
| dc.date.available | 2017-06-28T08:26:10Z | |
| dc.date.copyright | 2016-11 | |
| dc.degree | Μεταπτυχιακή Εργασία | el |
| dc.description.abstract | Οι μεταγραφικοί παράγοντες της οικογένειας των COUP TFs (Chicken Ovalbumin Upstream Promoter Transcription Factors), εμπλέκονται σε πλήθος γεγονότων της εμβρυικής ανάπτυξης και οργανογένεσης. Στην παρούσα μελέτη διερευνάται ο ρόλος του μεταγραφικού παράγοντα Coup-TFII στη βιολογία των νευροβλαστικών κυτάρρων (NBK). NBK απομονώνονται από τον εγκέφαλο πειραματόζωων, συγκεκριμένα από την περιοχή της υποεπενδυματικής ζώνης και καλλιεργούνται υπο την μορφή νευρόσφαιρων. Τα NBK είναι πολυδύναμα και μπορούν να διαφοροποιηθούν προς νευρικά ή γλοιακά κύτταρα. Οι νευρόσφαιρες καλλιεργούνται σε θρεπτικό μέσο με προσθήκη Epidermal Growth Factor (EGF) και Fibroblast Growth Factor (FGF) οι οποίοι προωθούν τον πολλαπλασιασμό των νευρικών προγονικών και βλαστικών κυττάρων. Κύτταρα που αναπτύσσονται σε θρεπτικό μέσο δίχως τους παραπάνω αυξητικούς παράγοντες διαφοροποιούνται στους διάφορους κυτταρικούς τύπους του Νευρικού Συστήματος (νευρικά, αστρογλοικά ολιγοδενδογλοιακά κύτταρα). Παράλληλα μελετάται η γλοιογένεση και η νευρογένεση σε κυτταρικό πληθυσμό που αναπτύσσεται σε συνθήκες διαφοροποίησης αλλά με σταδιακή αφαίρεση των αυξητικών παραγόντων . Με της χρήση της μεθόδου του ανοσοφθορισμού, σε συνθήκες πολλαπλασιασμού αλλά και διαφοροποίησης ταυτοποιήθηκαν οι προαναφερόμενοι κυτταρικοί τύποι και διαπιστώθηκε η ύπαρξη του COUPTF II και το προφίλ έκφρασης των κυτταρικών δεικτών που χρησιμοποιήθηκαν για το σκοπό αυτό . Επιπλέον, με τη μέθοδο της qPCR επιβεβαιώθηκε και ποσοτικοποιήθηκε η έκφραση των παραγόντων COUPTF I και COUP TF II στις διάφορες συνθήκες. Ακόλουθα, με τη χρήση ιικών φορέων, προκλήθηκε υπερέκφραση του Coup-TF ΙΙ σε νευρόσφαιρες, στο στάδιο που διατηρούν ακόμα το βλαστικό τους χαρακτήρα. Τα κύτταρα αυτά καλλιεργούνται σε συνθήκες πολλαπλασιασμού και διαφοροποίησης αντίστοιχα προκειμένου να μελετηθεί η επίδραση της τροποποίησης της έκφρασης του Coup-TFΙΙ στην αναπτυξιακή τους τύχη. | el |
| dc.description.translatedabstract | Transription factors of the COUP-TF family (Chicken Ovalbumin Upstream Promoter -Transription Factors) are involved in a significant number of events during embryogenesis and organ development. The aim of this study is to investigate the role of COUP-TFII in correlation with the biology of Neural Stem Cells (NSCs). NSCs are derived from the brain of lab animals, specifically from the Sub- Ventricular Zone (SVZ) of the lateral ventricles and then cultured so as to create 3-D aggregates called neurospheres. NSCs are multipotent and can be differentiated into neurons or glial cells. Neurospheres are cultured in medium containing EGF (Epidermal Growth Factor) and FGF (Fibroblast Growth Factor) which promote the proliferation of neural precursor and neural stem cells. Cells that grow in medium without the addition of the above mentioned factors differentiate into all the cell types found in the Central Nervous System (neurons, astrocytes, oligodendrocytes) Gliogenesis and Neurogenesis is studied in cells growing in conditions that promote differentiation but also in conditions of gradually removing growth factors from the cell culture medium. The expression profile of certain cell markers and the COUP-TFII transcription factors is ascertained by using the immunofluorescence method in the differentiating and proliferating cell populations. Furthermore, qPCR assay is used to quantify and confirm the COUP-TFI and COUP-TFII expression in all cases. Viral vectors are used to cause overexpression of COUP-TFII in neurospheres at proliferating conditions where they still maintain their multipotency. The infected cells are then cultured in proliferating as well as in differentiating culture conditions in order to study the effect of COUP-TFII overexpression in their developmental profile. | el |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10889/10381 | |
| dc.language.iso | gr | el |
| dc.rights | 0 | el |
| dc.subject | Νευροβλαστικά κύτταρα | el |
| dc.subject.alternative | Coup-TF | el |
| dc.subject.alternative | Neural stem cells | el |
| dc.subject.ddc | 573.853 84 | el |
| dc.title | Ο ρόλος των μεταγραφικών παραγόντων Coup-TF στη διαφοροποίηση των νευροβλαστικών κυττάρων | el |
| dc.title.alternative | The role of Coup-TF transcription factors in the differentiation of neural stem cells | el |
| dc.type | Thesis | el |