Επαναπρογραμματισμός αστρογλοιακών κυττάρων του εγκεφάλου μυών προς τη δημιουργία νευρώνων και γλοίων κυττάρων
Loading...
Date
2023-10-10
Authors
Κακογιάννης, Δημήτριος
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Ο επαναπρογραμματισμός αποτελεί μία νέα προσέγγιση στην αποκατάσταση οργάνων με περιορισμένη αυτοανανεωτική ικανότητα, όπως ο εγκέφαλος. Στην τεχνολογία αυτή χρησιμοποιούνται ιικοί φορείς. Μια ασφαλής και οικονομική εναλλακτική είναι ο χημικός επαναπρογραμματισμός, αντικαθιστώντας τους ιικούς φορείς με χημικά μόρια. Στην παρούσα εργασία, προκαλέσαμε τη διαφοροποίηση των Νευρικών Βλαστικών Κυττάρων (ΝΒΚ) απομονωμένων από την υποεπενδυματική ζώνη των πλάγιων κοιλιών σε αστροκύτταρα χρησιμοποιώντας ένα προσδιορισμένο πρωτόκολλο καλλιέργειας τους σε 10% Fetal Bovine Serum (FBS). Αφού επιβεβαιώσαμε την παρουσία αστροκυττάρων, επιχειρήσαμε τον επαναπρογραμματισμό τους σε τύπου προγονικά κύτταρα καταστέλλοντας τα σηματοδοτικά μονοπάτια GSK3 και TGF-β σε ένα περιβάλλον προωθεί την
αυτοανανέωση των ΝΒΚ. Για να χαρακτηρίσουμε αυτά τα κύτταρα, πραγματοποιήσαμε ανοσοκυτταροχημικές χρώσεις έναντι δεικτών βλαστικών και προγονικών κυττάρων
και συγκρίναμε τον μοριακό τους προφίλ με αυτό των νευροσφαιρών χρησιμοποιώντας RT-qPCR. Συνολικά, τα επαναπρογραμματισμένα κύτταρα εκφράζουν τους δείκτες
βλαστοκυττάρων Nestin και Sox2 και εμφανίζουν χαμηλότερη έκφραση των δεικτών διαφοροποίησης (Mash1 και Dlx2) και υψηλότερη έκφραση των δεικτών βλαστικότητας
(Glast, EGFR και CD9) σε σύγκριση με τις νευρόσφαιρες. Τέλος, εξετάσαμε την δυναμικό διαφοροποίησής τους, το οποίο παραμένει γλοιογενετικό με προτίμηση προς την ολιγοδενδρογένεση. Τα αποτελέσματά μας υποδεικνύουν ότι η καταστολή των σηματοδοτικών οδών GSK3 και TGF-β επαναφέρει τα αστροκύτταρα σε μια προγονική κατάσταση που ομοιάζει με τα ενεργοποιημένα ΝΒΚ.
Description
Keywords
Αστροκύτταρα, Επαναπρογραμματισμός, Αποδιαφοροποίηση